贝加尔雅罗鱼

mtDNA分析

1

采集时间:1981-1985

样品来源:新疆赛里木湖,新疆额尔齐斯河

取样部位:肌肉组织

样本数:10尾巴

实验技术:PCR扩增

目的基因:mtDNA Cytb

引物信息:L147245 G A C T T G A A A A A C C A C C G T T G 3

H151495 C C T C A GA A G G A T A T T T GT C CTC3

扩增条件:

扩增反应总体积为50微升,其中含有50 ng的模板DNA2.5 UTaq DNA聚合酶,1×buffer,每种引物浓度分别为02 μmolLdNTP浓度为100μmolLMg 浓度为15 mmolLPCR扩增反应在PE PTC100 热循环仪上进行。反应条件为:95 2 min后进行36个循环94 30 S49 30 S72 1 min。之后,反应72延伸10 min4结束。

扩增片段大小:489bp

图片说明:高体雅罗鱼等三种雅罗鱼mtDNA Cytb扩增结果

参考文献:

胡文革,段子渊,王金富等. 新疆3种雅罗鱼线粒体DNA细胞色素b序列的差异与系统进化 [J]. 动物学杂志, 2005, 40 (3) 6 .

2

采集时间:1981-1985

样品来源: 新疆赛里木湖,新疆额尔齐斯河

取样部位:肌肉

样本数:20

实验技术:PCR扩增

目的基因mtDNA D-loop

引物信息

P2-U(5’ -TTAACTCCCACCCCTGGCT-3’ )

P1-L(5’ –CACGTTCTCGAACCTTCCTT-3’


扩增条件:

扩增反应总体积为50 uL,其中含有50 ng的模板DNA16 UTaq DNA聚合酶,1 X Bufer,每种引物浓度分别为0.2μmolLdNTP浓度为100pmolLMg离子浓度为1.5 pmolLPCR扩增反应在PE PTC-100 热循环仪上进行。反应程序为:95 2 min94 30 S51 30 S72 1 min 30 S,进行35个循环;最后再72℃延伸10 min4℃结束。

扩增片段大小:827bp

参考文献:

胡文革,段子渊,王金富等. 新疆3种雅罗鱼线粒体DNA控制区序列的差异和系统进化关系 [J]. 遗传学报, 2004, 31 (9) 6 .

染色体

采集地点:新疆,伊犁河,三道河口

取样部位:肾

取样数量:3

检测单位:哈密师范学校

实验方法:体内注射小牛血清和秋水仙素短期培养,经低渗、固定、低片,干冻玻片制片,吉姆萨染色。

染色体数:2n=50

核型方式:2n=8m+16sm+26t



 
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